美国 FDA 于 1 月 29 日发布了《嵌合抗原受体（CAR）T 细胞产品的研发考量》定稿指南，提供了有关化学、生产和控制（CMC）、药理学和毒理学以及肿瘤适应症（包括血液恶性肿瘤和实体瘤）临床研究设计的 CAR-T 细胞具体建议。

指南中注明了针对自体或同种异体 CAR-T 细胞产品的具体建议。指南还为 CAR-T 细胞产品的分析可比性研究提供了建议。虽然该指南特别关注 CAR-T 细胞产品，但提供的一些信息和建议也可能适用于其它转基因淋巴细胞产品，例如 CAR 自然杀伤细胞或 T 细胞受体修饰 T 细胞。

指南定稿了 2022 年 3 月发布的指南草案，与初稿草案相比，定稿指南的修订包括澄清指南的范围、增加对癌症适应症的新关注、对使用先前接受过 CAR-T 细胞的患者的细胞起始物料制造 CAR-T 细胞的建议、表达多种转基因元件的 CAR-T 细胞的效力、稳定性研究和临床监测。

对于使用先前接受过 CAR-T 细胞的患者的细胞起始物料制造 CAR-T 细胞，FDA 在指南中指出，起始物料中先前给药的 CAR-T 细胞可能对 CAR-T 细胞生产（例如扩增或转导效率）、效力、体内扩增、安全性和有效性产生意想不到的影响。因此，可能需要评估细胞起始物料中先前给药的CAR-T细胞水平。这可以通过检测共同载体或 CAR 特征来评估先前施用的 CAR-T 细胞的存在来完成。此外，FDA 建议申办人收集白细胞去除术材料的保留样本，以备需要进行额外分析时使用。如果自体 CAR-T 细胞临床研究将招募既往接受过 CAR-T 细胞的患者和未接受过 CAR-T 细胞的患者，则应在临床研究设计和分析中评估和考虑 CAR-T 细胞的潜在差异。FDA 建议申办人在 IND 提交之前作为 IND 前会议的一部分与 OTP 讨论产品表征、测试、剂量和临床研究设计的这些注意事项。

FDA 还建议开展使用中稳定性研究，以支持新鲜产品的最终配方和给药之间的预期保留时间，或冷冻产品的解冻和给药之间的时间。由健康供体材料制造的产品可能足以支持早期稳定性研究。然而，为了获得许可，应提供额外的稳定性研究，包括由患者来源的起始材料制造的产品，以支持产品保质期的决定。

指南还指出，对于同种异体 CAR-T 细胞，每个产品批次旨在治疗多名患者，可能还需要进行额外测试。例如，批次放行测试中应包括额外的外源因子测试、潜在同种反应性淋巴细胞数量的严格可接受标准以及不存在异常生长。

关于表达多个转基因元件的 CAR-T 细胞的效力，每个转基因都可能有助于产品的安全性和有效性，因此应得到充分控制。可能需要进行效力测定来测量每种元素的预期生物活性，具体取决于每种转基因对产品活性的贡献。所提出的测定的合理性可能得到表征研究的支持。例如：

如果 CAR-T 细胞靶向多种抗原（例如 CD19 和 CD22），应该评估 CAR-T 细胞针对每个单独靶抗原的活性，因为产品的功能需要 T 细胞在与任一抗原结合时激活。

如果 CAR-T 细胞包含细胞因子转基因以增强 CAR 活性，则应评估 CAR-T 细胞针对靶抗原的活性以及转基因细胞因子的产生，因为细胞因子并不是主要负责针对靶抗原的 CAR-T 细胞活性。

如果 CAR-T 细胞包含赋予耐药性的转基因，则应该评估耐药性和 CAR-T 细胞活性，因为其具有独立的作用机制。