细胞外囊泡（Extracellular Vesicles，EV）一般指由细胞释放的具有脂质膜结构的颗粒统称，不具有自我复制能力，内含多种蛋白质和核酸分子，可向其他细胞递送功能性分子，被认为参与多种生命现象及疾病过程。EV药物逐渐成为细胞衍生物类药物、新型药物递送系统等研发领域的重要方向。

6月23日，日本药品和医疗器械管理局（PMDA）发布早期考虑文件，基于厚生劳动省（MHLW）于3月17日发布的《关于确保人源细胞来源天然细胞外囊泡（EV）药品质量的指南（草案）》，阐明PMDA现阶段对于将EV制剂作为临床试验用药开发时质量方面的监管考量。该文件适用于以人源细胞来源、经纯化的EV为有效成分、以取得药品上市许可为目标的EV制剂，同时亦适用于经基因导入、肽修饰或分子内包等人工改造的改造型EV制剂。

安全性为首要考量，难点在于外来感染性物质的管理

EV制剂的生产使用细胞基材等生物来源原材料，且EV在粒径、电荷等理化特性上与病毒相似，因此可能难以设定具病毒清除力的纯化工艺。在确保EV制剂安全性时，申办者应审慎构建外来感染性物质管理策略，PMDA要求依据ICH Q5 (R2)指南选择原材料并实施病毒检测。

此外，申办者需确认杂质去除状况并设定安全性相关规格及试验方法，在首次临床试验计划书申报中，需就《关于修订药物临床试验计划备案及试验实施等相关问答（Q&A）的通知》的Q27对试验药的安全性信息予以说明。若对研发制剂的安全性存在顾虑，PMDA建议在初次申报前进行面对面咨询。

杂质控制与剂型相关安全性，关注致癌风险

在杂质控制方面，申办者需掌握宿主细胞来源的蛋白/DNA、培养基添加物及层析介质等工艺相关杂质的去除状况。由于EV来源蛋白与宿主细胞蛋白难以分离，可通过总蛋白量与颗粒数的比率进行管理。

此外，PMDA建议确认细胞基质来源的EV以外微粒及生产过程混入的外来微粒，并评估其对安全性的影响。制剂应依据剂型，结合日本药典制剂通则设定不溶性微粒检查等试验。若使用永生化原代培养细胞，需评估制剂中永生化基因来源核酸或蛋白的含量，尽可能去除这些杂质以降低潜在致癌风险。

作用机制未明，细胞基质须在开发早期确定

在安全性以外的留意事项中，PMDA指出，首次临床试验阶段EV制剂的作用机制及活性成分（蛋白质、microRNA等）可能尚未明确，建议采用多种体系进行多维度评价，广泛收集作用机制及活性成分信息。鉴于进行宿主细胞永生化等细胞基质变更时难以证明变更前后的可比性/同质性，细胞基质应在非临床试验实施前等开发早期阶段确定。

现阶段EV的药学研究技术仍处于快速发展阶段，研发与评价体系亦在持续探索与完善过程中。以EV为题检索识林，可知FDA和EMA尚无专门指南。日本PMDA之外，我国CDE于5月27日发布的《细胞外囊泡药物申报临床试验药学研究的问答文件（征求意见稿）》，与本文主题基本一致，涵盖生产用细胞基质、原辅料控制、工艺开发、质量研究、稳定性研究等关键环节，可与本文结合参考。