核药赛道日渐火热，诺华可谓是当之无愧的领头羊。2018年，诺华的Lutathera（177Lu-DOTA-TATE）被FDA批准用于过表达生长抑素受体的胃肠胰腺神经内分泌肿瘤。2022年，诺华的Pluvicto（177Lu-PSMA-617）在mCRPC患者中的获批，更是治疗用核药的一个里程碑事件。Lutathera和Pluvicto的商业化成功，奠定了诺华在核药赛道的领先地位。

近日，诺华为了进一步扩大其在Radioligand Therapy的布局，扩大与日本Peptidream公司的多肽发现合作，并收购了Mariana Oncology公司获得其一系列核药管线。接下来，笔者主要介绍一下这两家公司的突出技术点，满足好奇心，这两家公司到底有什么被诺华看中。

Peptidream是一家位于日本的生物公司，成立于2006年，专注于开发和应用多肽药物发现技术，其核心技术平台为Proprietary Drug Discovery Platform System(PDPS) 。PDPS是基于体外mRNA展示技术，能够生成高度多样化的大环肽文库，这些文库可以针对几乎任何感兴趣的生物靶点进行筛选，快速(~1个月)并高成功率(>95%)发现命中分子，从而开发基于多肽、小分子或Peptide Drug Conjugates(PDC)的疗法。

mRNA展示技术大概的技术路线如下，先构建大容量随机DNA库，在体外将其转录为mRNA，并在3’端连接嘌呤霉素。接着，在体外利用核糖体以mRNA-Linker-Puromycin为模板翻成mRNA-肽复合物，这是其核心步骤。Puromycin具有与酪氨酰-tRNA末端相似的结构，能够进入核糖体A位点，其结构上的O-甲基酪氨酸与肽链C端氨基酸形成共价连接，从而将mRNA和生成的肽链连接起来。

此外，由于mRNA易降解，且RNA的二、三级结构会与靶点发生竞争性结合，产生干扰，因此需将mRNA逆转录cDNA。所有肽都用各自的 mRNA/CDA 标签进行“条形码”编码。对得到的cDNA/mRNA-肽复合物库进行筛选，并分离出可特异性结合目标靶点的cDNA/mRNA-肽复合物。最后，与噬菌体展示类似，mRNA展示技术也是通过DNA测序对特异性序列进行简单的反推，也可以通过PCR和连续富集循环进行扩增。

除了mRNA展示技术的打底，Peptidream PDPS的核心竞争力还在于Flexizyme酶。PDPS除了在体外能够无细胞的转录翻译20种天然氨基酸之外，还能翻译大量非天然氨基酸，大大扩展了库的多样性，这就归功于Flexizyme酶。Flexizyme是一种体外进化的核酶，由共同创始人Hiroaki Suga发现。Flexizyme 酶能高效催化天然氨基酸和特殊氨基酸与tRNA 结合形成tRNA-氨基酸复合物，为翻译做准备。

研究人员先使用Flexizyme连接非天然氨基酸与相应tRNA，并将其作为元件加入到翻译系统中，从而获得非天然多肽。Peptidream目前对外宣传是能够翻译三千多种天然、非天然氨基酸，肽库库容可以做到Trillions数万亿条，多样性十分可观。

参考来源：

1、DOI: 10.1038/S41570-019-0159-2
2、https://www.peptidream.com/en/science/evolution/
3、https://www.peptidream.com/en/science/pdps/
4、https://www.marianaoncology.com/our-science/