2020年12月7日    出处：https://www.sciencedaily.com/releases/2020/12/201207161535.htm

使用CRISPR/Cas9技术去除一种已知可以抑制CAR - T细胞活化的蛋白，可以增强T细胞消除血癌的能力。

击倒一个已知蛋白抑制T细胞激活T细胞对汽车使用CRISPR / Cas9技术增强设计的T细胞的能力,消除血液癌症,根据最新的临床前数据从佩雷尔曼医学院的研究人员在宾夕法尼亚大学和宾夕法尼亚大学的艾布拉姆森癌症中心。

该研究结果将在12月7日举行的第62届美国血液学年会暨博览会上发表。

研究小组使用CRISPR-Cas9敲除了CAR - T细胞上的CD5基因——它编码T细胞表面的CD5蛋白，并能抑制它们的激活，然后将它们注入患有T细胞和b细胞白血病或淋巴瘤的小鼠体内。与注入未编辑的CAR - T细胞的小鼠相比，注入cd5缺失的CAR - T细胞的小鼠外周血中T细胞增殖水平更高，肿瘤大小显著减少，生存效果更好。

CRISPR技术使科学家能够定位和编辑任何不想要的基因。对于癌症，它通过删除T细胞中的特定基因来帮助更好地对抗肿瘤。这种方法与CAR - T细胞疗法密切相关，在CAR - T细胞疗法中，研究人员收集患者自身的T细胞，并改造它们表达一种新的受体，寻找并攻击癌细胞。

“我们已经表明,第一次,我们可以成功地使用CRISPR-Cas9摧毁CD5买车T细胞攻击癌细胞,提高他们的能力,”马可Ruella说,医学博士,医学助理教授在该部门在宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的血液病与科学淋巴瘤项目主任,谁将呈现结果。“在几个癌症模型中，编辑过的和未编辑过的CAR - T细胞之间的差异是惊人的。”

作者首先在t细胞白血病模型中测试了这种方法。抗CD5的CAR - T细胞是通过基因工程来寻找恶性T细胞上的CD5并攻击它们。由于CD5也在正常T细胞上表达，作者将其从CAR - T细胞中移除，既避免了可能杀死其他CAR - T细胞，也有可能释放CAR - T细胞激活，否则这些细胞上存在CD5会抑制CAR - T细胞激活。

的确，在体外和体内实验中，CD5缺失的抗CD5 CAR - T细胞比没有缺失的CAR - T细胞(野生型，CD5+)更有效，超过50%的小鼠在长期治疗后治愈。

为了验证CD5缺失可以增加靶向CD5以外抗原的CAR - T细胞的抗肿瘤作用这一假说，然后在CTL019 CAR - T细胞对抗CD19+ b细胞白血病的实验中验证了这一结果。值得注意的是，同样在该模型中，CD5敲除导致CTL019 CAR - T细胞抗肿瘤疗效显著增强，并在大多数小鼠中延长完全缓解期。

在报告当天公布的另一份分析报告中，研究小组回顾了8000多名患者的肿瘤活组织检查的基因组数据库，以研究他们的CD5水平，并发现了与结果的相关性。“基本上，在大多数癌症类型中，T细胞中CD5表达越少，结果越好，”Ruella说。“T细胞中的CD5水平很重要。”

这一发现是向前迈出的重要一步，可能为未来的临床试验奠定基础，以探索如何结合CAR - T细胞治疗和CRISPR-Cas9基因编辑，改善现有的和新的细胞疗法。

治疗，如penn开发的CAR - T细胞疗法，Kymriah(诺华)，用于儿童和成人血癌患者可以在复发或难治性b细胞急性淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤诱导显著反应。然而，许多患者没有反应或最终复发。更重要的是，CAR - T细胞疗法在一些血液系统恶性肿瘤中尚未被证明有效，如T细胞淋巴瘤和白血病——血液肿瘤中经常表达CD5。CD5也在绝大多数慢性淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤患者中表达，也在约20%的急性髓细胞白血病病例中表达。

如今，许多增强CAR - T治疗的方法都涉及到针对T细胞衰竭的联合治疗，特别是PD-L1/PD-1轴。这个团队的策略是不同的，因为它的目标是在T细胞的早期激活期间进行干预，这可以打开机会，增加T细胞在肿瘤微环境中的功能。

“长期看,这可能是一个更普遍的策略来提高汽车的抗肿瘤效应T细胞,”卡尔说,医学博士,教授理查德·w·模糊免疫疗法和中心主任细胞免疫疗法在艾布拉姆森癌症中心和帕克癌症免疫疗法研究所主任佩雷尔曼医学院的宾夕法尼亚大学的该研究的作者之一。“我们期待在下一阶段的工作中，以这些令人鼓舞的研究结果为基础。”

研究人员说，研究这种cd5缺失的CAR - T细胞方法的一期临床试验最早将于2021年开始。