以T细胞为基础的靶向治疗如靶向T细胞的双特异抗体，CAR-T疗法已经在血液瘤中取得了成功，目前已经有三款靶向T细胞的双抗获批上市（CD19/CD3,CD20/CD3,BCMA/CD3），多款CAR-T疗法获批（CAR-CD19，CAR-BCMA）。

这些疗法在有效治疗肿瘤的同时也存在一些其它问题，如长时间的用药导致肿瘤获得耐药性，并且这些耐药后的肿瘤更具侵袭性。对于CAR-T疗法，其中最常见的耐药性是靶向抗原的丢失。而对于双特异抗体，相关耐药机制研究相对较少，最近，罗氏联合多个研究结构研究了TCB双抗的耐药机制。研究表明，对于不同靶点的TCB疗法，肿瘤的获得性耐药机制不同。对这些不同的耐药机制的研究，不仅可以为抗体的设计提供指导，而且可以为后续临床的联合用药提供理论基础。

CEA/ HER2-TCB不同的耐药机制

根据以往的经验，研究者首先推测肿瘤获得性耐药主要是因为相关靶点的地表达导致的，因此对相关耐心性肿瘤细胞表面的抗原密度进行分析，分析结果表明，两种不同的TCB的疗法的肿瘤具有不同 的耐药性机制，如靶向CEA/CD3的双抗耐药主要是肿瘤下调靶标蛋白的表达，而靶向HER2/CD3的双抗的耐药主要是通过阻断IFN-γ通路。

对于表达CEA的肿瘤细胞，肿瘤细胞表明抗原密度的降低是这些肿瘤产生获得性耐药的主要原因，而这些抗原表达的下调是否是因为转录水平的降低呢，研究者利用5-AZA处理耐药的肿瘤细胞，药物处理48小时后，肿瘤细胞表明的抗原表达增加，且这种增加是永久性了，也就是说5-AZA处理可以逆转肿瘤的耐药性，该结果无论是在体内还是在体外都得到了验证。

在体外获得性耐药肿瘤主要是肿瘤细胞表明抗原表达的降低，那在体内呢？研究者利用PDX模型获得了对CEACAM5-TCB耐药的肿瘤，对这些耐药的肿瘤分析证明，这些肿瘤与原来TCB敏感性肿瘤相比，细胞表面的抗原表达下调。但是，在这两类肿瘤中，T细胞的浸润程度相当，因此再次证明肿瘤对CEACAM5-TCB的获得性耐药主要是肿瘤表面抗原的降低。

IFN-γ信号下

调介导肿瘤对HRE2-TCB的耐药

初步的研究表明，对于靶向HER2的TCB，肿瘤获得性耐药的机制与CEACAM5-TCB类不同，其耐药后肿瘤细胞表面的HER2抗原并没有降低。有研究表明，肿瘤对IFN-γ的反应与其对桥接T淋巴细胞治疗的反应具有密切关系。体外实验表明， HRE2-TCB耐药的肿瘤细胞对IFN-γ具有耐药性，并且其相关信号通路如p-STAT1和 IRF1的激活都不足。

而对于不耐要的肿瘤细胞，利用基因编辑敲除IFNGR1，肿瘤细胞会对HRE2-TCB和IFN-γ都产生耐药性（下图D和E），而在这些敲除的肿瘤细胞中过表达IFNGR1时，这些肿瘤细胞会恢复对HRE2-TCB的敏感性。另外，对IFN-γ相关通路分析表明，与野生型肿瘤相比，获得性耐药的肿瘤中IFNGR1和JAK2表达降低。

总结

大多数药物的治疗最后的归宿都是耐药性，包括目前疗效很好的双抗疗法和CAR-T疗法，因此清除的认识获得性耐药产生的机制以及其背后深层次的原理，可以指导将来药物的开发，并且可以有效的防止耐药性的产生。罗氏以其TCB双抗为基础，研究表明不同靶点肿瘤其产生耐药性的原因有所不同，因此在实际的药物开发中，需要具体靶点具体分析研究，并根据不同的耐药机制确定联合用药方案。

参考文献：
Alex Martı´nez-Sabadell, Beatriz Morancho, Irene Rius Ruiz et al.The target antigen determines the mechanism of acquired resistance to T cell-based therapies.Cell Reports 2022