通过治疗性疫苗诱导HBV特异性免疫反应是治疗慢性HBV感染的一种有前途新疗法。德国研究人员已经研制了一种临床候选治疗性乙型肝炎疫苗(TherVacB)，该疫苗基于重组乙肝表面抗原和核心抗原(HBsAg、HBcAg)的两种蛋白免疫和表达HBV抗原的改良痘苗病毒安卡拉载体(MVA)的加强免疫。

DNA疫苗可以克服临床使用的重组蛋白纯化复杂和昂贵的缺点，从而直接在体内生产感兴趣的抗原。因此，德国研究人员的目标是研制覆盖最常见的HBV基因型和血清型的DNA疫苗，以拓宽和提高TherVacB诱导的B细胞和T细胞免疫应答。

研究人员构建了编码A、B/C型HBV小、大包膜蛋白，B/C、D型核心蛋白及HBV逆转录酶(RT)结构域的治疗性DNA疫苗(DNA-HBVac)。用 Western blotting 和 ELISA 检测表达抗原在体外的稳定性和完整性，在C57BL/6小鼠和反映HBV持续感染的AAV-HBV小鼠模型上检测DNA-HBVac的免疫原性。用ELISA和流式细胞仪检测HBV特异性B细胞和T细胞应答。

体外分析表明，所有DNA-HBVac编码的HBV蛋白都得到了正确表达。DNA-HBVac 初免 和 MVA-HBVac 增强免疫 C57BL/6 小鼠安全、耐受性好。与以前的免疫策略相比，该方案导致了非常强的HBV特异性CD8和CD4 T细胞反应，但正如预期的那样，抗HBs反应很低。

在持续HBV感染模型AAV-HBV转导小鼠中，研究发现DNA-HBVac在小鼠的肝脏中诱导了强烈的核心、包膜和RT特异性的CD8T细胞应答。此外，在DNA-HBVac疫苗接种期间，观察到血清ALT显著升高，这表明肝脏中的细胞毒性T细胞活性增加。这些强烈的HBV特异性CD8T细胞反应导致血清HBsAg和HBeAg显著降低，甚至在一些小鼠中HBV被清除。

该项研究结果表明，DNA-HBVac 可能是一种有希望的替代经典的重组蛋白启动的TherVacB 方案，这种方案不需要劳动密集型和昂贵的重组蛋白纯化。

信息来源EASL2020SAT439

Multicistronic DNA-based therapeutic vaccine as a promising candidate to treat chronic hepatitis B virus (HBV) infection