据估计，全世界有超过2.5亿的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者，这些感染者有患慢性肝病和肝细胞癌的危险。目前已经开发了多种核苷（酸）类似物作为直接作用抗病毒药物进行慢乙肝治疗，尽管此类药物有效，但它们不能治愈，在某些情况下，长期使用甚至会出现病毒耐药。这促使必须开发新的病毒靶标，包括病毒核衣壳。

埃默里大学的小组发现了GLP-26，这是一种独特的乙二酰胺衍生物，可影响HBV核衣壳的形成和cccDNA库的补充。 除了有希望的临床前概况，GLP-26 在体外还显示出对HBeAg 分泌和 cccDNA 扩增具有重要作用。 为了进一步表征该化合物，使用了能产生高水平 HBV DNA 的AD38裸鼠模型中评估其抗HBV效应。

研究方法

使用裸鼠/ AD38小鼠模型表征GLP-26 单药和与恩替卡韦（ETV）联合使用的抗病毒活性。简而言之，在年轻雄性裸鼠背部的单个位置皮下注射1 x 107个HepG2 / AD38细胞。当肿瘤出现并在2-3周后达到直径5 mm时，将小鼠眶后放血，并通过实时PCR测定基线病毒水平。 然后在其饮用水中给小鼠四环素（2.5 mg / mL，隔两天更新一次），持续10天，以使肿瘤进一步生长，同时病毒复制仍然受到抑制。

在此期间结束时，将小鼠停喂四环素，再次放血以确定病毒滴度，然后再用ETV（10 mg / kg，3周），GLP-26（55 mg / kg，一周3次） ，联合疗法（与上述剂量和时间表相同）或安慰剂（仅三氯蔗糖）治疗45天。定期测定病毒效价，通过卡尺测量确定肿瘤大小，然后绘制每组随时间的标准化病毒水平。

从停用四环素的时间（第0天）到实验结束（第45天），八只经ETV治疗的小鼠中有七只显示 HBV DNA 滴度平均降低 0.56 log10。 对于仅用 GLP-26 治疗的所有11只小鼠，病毒复制均被抑制（与对照组相比），但是到第45天时，在8只小鼠中观察到 1.14 log10 反弹。在9只用ETV + GLP-26组合治疗的小鼠中，所有病毒复制受到抑制，到第45 天平均降低为 2.05 log10（P <0.005）。 在这些小鼠中，有一半在一个或多个时间点无法检测到 HBV DNA。 相比之下，安慰剂治疗组7只小鼠在第45天显示 HBV DNA 滴度平均增加 2.53 log10。

与对照相比，ETV 和 GLP-26 都抑制了病毒复制。 在ETV治疗的小鼠中很少出现部分反弹，而在 GLP-26 治疗的小鼠中更频繁出现。 GLP-26 可能导致在治疗过程中产生抗药性，这将通过在治疗结束时对这些小鼠中的病毒DNA进行测序来进一步评估。 与单独使用ETV或GLP-26治疗的组相比，联合治疗在第45天的疗效更强，病毒载量降低有1.5-2 log10。但是，与安慰剂组相比，联合治疗的病毒效价在第45天的差异约为4.6 log10。 与未治疗的动物（第4组）相比，单一治疗组在45天时的病毒滴度降低了 2.3-3 log10。 这些结果表明，与在这种新小鼠模型中的安慰剂对照相比，联合疗法相对于单一疗法具有协同抑制病毒的作用。（更多肝病新药研究信息敬请关注“肝脏时间”微信公众号）！

信息来源HepDART 2019论文集：Antiviral activity of a hepatitis B capsid assembly modulator alone and in combination with entecavir in an AD38 nude mouse model